Главная Обратная связь

Дисциплины:






ПРЕПАРАТ №1 ПРЕПАРАТ №2. Тельца Бабеша-Негри Включения в эпителиальных



Тельца Бабеша-Негри Включения в эпителиальных

в срезе из аммонова рога клетках слюнной железы при

окраска по Маннуцетомегалии

окраска по Романовскому-Гимзе

 

 

ЗАНЯТИЕ №16

ТЕМА: Гепатотропные вирусы - возбудители гепатитов А, В, С, D.

ВИЧ-инфекция.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Ознакомиться с методами диагностики гепатитов А, В, С, D, и ВИЧ-инфекции.

3. Уметь учитывать результаты ИФА для диагностики вирусного гепатита В.

4. Уметь учитывать результаты иммуноблотинга для диагностики ВИЧ-инфекции.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Вирусы гепатита А. Классификация и общая характеристика, роль в патологии человека, патогенез, иммунитет, лабораторная диагностика и профилактика гепатита А

2. Вирусы гепатита В. Классификация и общая характеристика, роль в патологии человека, патогенез, иммунитет, лабораторная диагностика и профилактика гепатита В.

3. Вирусы гепатита D. Классификация и общая характеристика, роль в патологии человека, патогенез, иммунитет, лабораторная диагностика и профилактика гепатита D.

4. Вирус гепатита С. Классификация и общая характеристика, роль в патологии человека, патогенез, иммунитет, лабораторная диагностика и профилактика гепатита С.

5. Ретровирусы: классификация и характеристика семейства. Вирусы иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), структура вириона.

6. Патогенез ВИЧ-инфекции. СПИД-ассоциациированные заболевания.

7. Лабораторная диагностика и профилактика ВИЧ-инфекции.

8. Биопрепараты: вакцина против гепатита В, вакцина против гепатита А.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2.Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 323-35, 330-335, 348-361.

3.«Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 29-41.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Постановка ИФА для определения HBs-антигена в сыворотке крови больных.

Реагенты

1) Иммуносорбент – планшет полистироловый с адсорбированными на внутренней поверхности лунок моноклональными антителами к HBsAg.

2) Исследуемый материал от больного (сыворотка).

3) Положительный контрольный образец (К+), содержащий рекомбинантный HBsAg, инактивированный.

4) Отрицательный контрольный образец (К–), не содержащий HBsAg, инактивированный.

5) Поликлональные антитела к HBsAg из сыворотки крови кролика.

6) Конъюгат – антитела против глобулинов кролика, меченые пероксидазой хрена.

7) Субстратный буферный раствор, содержащий пероксид водорода.

8) Раствор хромогена тетраметилбензидина (ТМБ).

9) Стоп-реагент – раствор 2M серной кислоты.



 

Проведение анализа

1) Внесение исследуемых и контрольных образцов.

В лунки планшета, например, А-1 и А-2, В-1 и В-2, С-1 и С-2 и т.д 1 внести по 100 мкл исследуемых сывороток в дублях.

Внесение контрольных образцов:

100 мкл (К–) в лунки А-11 и A-12;

100 мкл (К+) в лунки В-11 и В-12.

2) Добавление во все лунки по 50 мкл рабочего раствора поликлональных антител к HBsAg. Инкубация 60 мин при 37°С в термостате.

3) По окончании инкубации содержимое лунок тщательно аспирировать в сосуд с дезинфицирующим раствором.

4) Внести во все лунки по 100 мкл рабочего раствора конъюгата. Инкубировать в течение 30 мин при температуре 37°С.

5) По окончании второй инкубации удалить содержимое лунок и промыть планшет 5 раз.

6) Внести во все лунки по 100 мкл рабочего раствора хромогена тетраметилбензидина и инкубировать в темноте в течение 30 мин при температуре 18–25°С.

7) Внести во все лунки по 100 мкл стоп-реагента.

8) Измерить оптическую плотность на многоканальном фотометре при 450 нм с фоновой длиной волны 620–650 нм.

 





sdamzavas.net - 2018 год. Все права принадлежат их авторам! В случае нарушение авторского права, обращайтесь по форме обратной связи...