Главная Обратная связь

Дисциплины:






Этапы приготовления мазка.



Для приготовления мазка необходимо иметь:

· Чистое обезжиренное предметное стекло.

· Бактериологическую петлю.

· Культуру, выращенную на плотной питательной среде- агаре, или жидкой –бульоне.

· Спиртовку.

· Набор красок.

1. Обезжиренное предметное стекло и бактериологическую петлю прожигают в пламени горелки. Пробирку с изучаемой культурой держат между указательным и большим пальцами левой руки. Петлю берут правой рукой, мизинцем правой руки прижимают пробку пробирки к ладони.

Если мазок готовится с жидкой питательной среды, то каплю культуры наносят петлей на предметное стекло.

Если мазок делают из культуры с агара, то петлю с культурой вносят на предметное стекло и добавляют каплю физиологического раствора, в котором эмульгируют внесенный материал.

Петлю обжигают в пламени горелки. Мазок должен быть тонким, равномерно растертым, округлой формы, размером 1,5-2см2.

2. Высушивание мазка производится при комнатной температуре.

3. Фиксация мазка производится с целью:

· Убить микробные клетки.

· Обеспечить лучшее прилипание микробов к предметному стеклу.

· Обеспечить дальнейшее окрашивание.

Фиксация мазка в пламени горелки производится 3-кратно, действие пламени должно длится 2 секунды.

Для более нежной фиксации мазков крови, спирохет и простейших используют химические фиксаторы:

· Метиловый спирт в течении 5-и минут.

· Этиловый спирт (960) в течении 10-и минут.

· Смесь Никифорова – в течении 10-15 минут.

· Ацетон – в течении 5-и минут.

· Пары формалина – в течении нескольких секунд.

4. Окраска препаратов проводится:

· Простыми методами (водным фуксином Пфейффера, метиленовой синькой Леффлера), когда окрашивается вся клетка и используется только один краситель;

· Сложными методам, когда определяются клеточные структуры.

После экспозиции мазок промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют под иммерсией.

 

 

Основные правила микроскопии.

(микроскопия готовых препаратов)

Световой микроскоп – это обязательная принадлежность любой микробиологической лаборатории. Разрешающая способность светового микроскопа 0,2 мкм. Общее увеличение микроскопа определяется произведением объектива на увеличение окуляра.

Микроскопия с сухими объективами дает увеличение в 120-600 раз. Недостаток: часть лучей отклоняется в сторону и не достигается хорошее освещение изучаемого объекта. Иммерсионные объективы – это объективы, которые погружают в жидкости (кедровое масло, персиковое масло). Поскольку показатели преломления стекла и иммерсионного масла практически одинаковы 1,52, сохраняется четкость и ясность поля зрения. Полезное увеличение микроскопа достигает 2000 раз. Современный микроскоп – это точный оптический прибор, поэтому необходимо строго соблюдать ряд правил при работе с ними:

1) использовать правильное освещение;

2) хранить закрытым от пыли;

3) для чистки оптических частей применять кисточку или мягкую ткань, смоченную водой или спиртом. Раз в год микроскоп должен просматривать мастер-оптик.

 

 





sdamzavas.net - 2017 год. Все права принадлежат их авторам! В случае нарушение авторского права, обращайтесь по форме обратной связи...