Главная Обратная связь

Дисциплины:






Определение группы крови



Проводят при температуре +150С - +250С по стандартным изогемагглютинирующим сывороткам:

· под соответствующими обозначениями группы крови на тарелку наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворотки I (бесцветная), II (голубая), III (розовая) групп крови (титр 1:32) в объеме 0,1 мл (одна большая капля около 1 см в диаметре);

· наносят две серии сывороток каждой группы;

· шесть капель исследуемой крови (величиной примерно с булавочную головку) по 0,01 мл;

· последовательно переносят сухой стеклянной палочкой на пластину (тарелку) в шесть точек, каждую рядом с каплей стандартной сыворотки (соотношение кровь: сыворотка равно 1:10);

· осторожно перемешивают разными палочками (или уголками предметных стекол);

· после перемешивания тарелку периодически покачивают;

· агглютинация начинается в течение первых 10-30 сек., однако наблюдают до 5 минут ввиду возможности поздней агглютинации;

· в те капли, где агглютинация произошла, добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия (проверка на ложную агглютинацию).

 

Оценка результата:

· все три сыворотки в обеих сериях не дают агглютинацию – I (0) группа крови;

· реакция отрицательна с сыворотками II (А) группы и положительна с I (0) и III (В) группами - II (А) группа крови;

· реакция отрицательна с сыворотками III (В) группы и положительна с I (0) и II (А) группами – III (В) группа крови;

· реакция во всех шести сыворотках положительна – IV (AB) группа крови. Необходима проверка с сывороткой IV(AB) группы.

По стандартным изогемагглютинирующим сывороткам и стандартным эритроцитам (перекрестный способ):

· кровь берут в сухую пробирку (из вены), центрифугируют или оставляют в покое на 20-30 мин. для разделения на сыворотку и эритроциты;

· на маркированную тарелку пипеткой в 6 ячеек наносят по одной большой капле сыворотки исследуемой крови из пробирки (0,1 мл), а рядом с ними – по одной малой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов I(0), II(А), III(В) групп по две серии;

· дальнейшие мероприятия проводятся аналогично методу с использованием стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Реакция со стандартными сыворотками проводится параллельно.

 

Оценка результатов (оценивают обе реакции):

· отсутствие агглютинации с эритроцитами I(0)группы и наличие ее с эритроцитами II(А) и III(В) групп – кровь I(0) группы;

· отсутствие агглютинации с эритроцитами I(0) и II(А) групп и наличие ее с эритроцитами III(В) группы – кровь II(А) группы;

· отсутствие агглютинации с эритроцитами I(0) и III(В) групп и наличие ее с эритроцитами II(А) группы – кровь III(В) группы;



· отсутствие агглютинации с эритроцитами всех трех групп – кровь IV(АВ) группы.

 

С помощью моноклональных антител (цоликлонов):

· нанести цоликлоны анти-А и анти-В на белый планшет по одной большой капле (0,1мл) под соответствующими надписями;

· рядом нанести по одной малой капле (0,01мл) исследуемой крови;

· перемешать и наблюдать за реакцией в течение 2-3 мин.

 

Оценка результатов:

· отсутствие агглютинации с обеими цоликлонами – кровь I(0)группы;

· наличие агглютинации с цоликлоном анти-А и отсутствие с анти-В – кровь II(А) группы;

· наличие агглютинации с цоликлоном анти-В и отсутствие с анти-А – кровь III(В) группы;

· агглютинация с обеими цоликлонами – кровь IV(АВ) группы.

 

Рис. 28. Методика определения Рис. 29. Интерпретация данных при определении

группы крови. групп крови.

Проведение пробы на индивидуальную совместимость по системе АВО и резус – фактору.

Проба на индивидуальную совместимость по системе АВ0:

· на чашку Петри наносят крупную каплю (0,1мл) сыворотки крови реципиента и малую каплю (0,01мл) крови донора из флакона;

· смешивают их между собой, покачивая чашку Петри;

· проба проводиться при 15-25Со, результаты оценивают через 5 мин.

Отсутствие агглютинации эритроцитов донора свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента по системе АВ0.

 

Проба на индивидуальную совместимость по резус-фактору - проводится по трем вариантам:

 

Проба с использованием водной бани:

Техника проведения пробы аналогична пробе на индивидуальную совместимость (описана выше), только после смешивания крови с плазмой чашка Петри помещается на водяную баню при температуре 42-450С. Оценка результатов производится через 5-10 мин. Если происходит агглютинация, то кровь несовместима в отношении резус-фактора.

Проба с использованием 33% раствора полиглюкина - реакция в центрифужной пробирке без подогрева в течение 5 мин:

· на дно пробирки вносят 2 капли сыворотки реципиента, 1 каплю крови донора и 1 каплю 33% раствора полиглюкина;

· содержимое перемешивают, вращая пробирку вокруг оси в течение 5 мин;

· добавляют 3-4 мл физиологического раствора и перемешивают не взбалтывая.

Наличие агглютинации эритроцитов свидетельствует о несовместимости крови донора и реципиента по резус-фактору.

 

Проба с использованием 10% желатина:

· на дно пробирки помещают 1 каплю эритроцитов донора, отмытых десятикратным объемом физ. раствора;

· добавляют 2 капли сыворотки реципиента и 2 капли, подогретого до разжижения, 10% раствора желатина;

· перемешивают и греют на водяной бане при 46-48оС 10 мин;

· добавляют 6-8 мл физ. раствора, перемешивают не взбалтывая.

Наличие агглютинации свидетельствует о несовместимости крови донора и реципиента.

 





sdamzavas.net - 2019 год. Все права принадлежат их авторам! В случае нарушение авторского права, обращайтесь по форме обратной связи...