Главная Обратная связь

Дисциплины:






Количественное определение холестерина в сыворотке крови



по модифицированному методу Златкис-Зака*

 

Принцип метода: содержащийся в плазме или сыворотке крови свободный и эфирносвязанный холестерин окисляется хлорным железом в присутствии концентрированной серной и ортофосфорной кислот с образованием ненасыщенных продуктов, окрашенных в красно-фиолетовый цвет. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации холестерина (присутствие следов воды мешает развитию окраски !).

Реактивы и оборудование: 1) Реактив для цветной реакции:

● основной раствор красителя (2,5 г хлорного железа растворить в 100 мл ортофосфорной кислоты), ● рабочий раствор красителя (8,0 мл основного раствора развести до 100 мл концентрированной серной

кислотой); 2) этанол; 3) калибровочный раствор холестерина в этаноле,

содержащий 1,6 мг/мл (3 ммоль/л); 4) штатив с химическими пробирками (сухими!); 5) микропипетка для взятия сыворотки на 0,1 мл; 6) пипетка на 2мл; мерная центрифужная пробирка для отмеривания реактива для цветной реакции; 8) фотоэлектроколориметр.

Ход работы: в пробирку прибавляют микропипеткой 0,1 мл сыворотки крови, добавляют 1,4 мл этанола. Осторожно по стенке пробирки добавляют 2,0 мл реактива для цветной реакции, пробу хорошо встряхивают (но осторожно, направляя при этом отверстие пробирки от себя и окружающих), оставляют на 30 минут при комнатной температуре. Развивается красно-фиолетовая окраска. Полученный окрашенный раствор колориметрируют на ФЭКе, против реактивов без добавления сыворотки крови. Светофильтр зеленый (λмакс.= 540 нм). Расчет концентрации холестерина проводится с помощью калибровочной кривой.

Результаты: Д1= С1=

Д2= С2=

 

содержание холестерина рассчитывают по формуле

 

Х = С × 100/0,1 = мг% × 0,0258 = ммоль/л, где

 

0,1 - количество мл сыворотки, взятое на исследование

С - количество холестерина в крови в мг, найденное по калибровочному графику после определения оптической плотности пробы (Д).

Норма содержания холестерина в сыворотке крови 3,6-6,4 ммоль/л.

 

Тестовый контроль по теме «Обмен холестерина. Липопротеины»

Тест 1

ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:

Лимитирующей стадией биосинтеза холестерина является реакция, в ходе которой образуется:

а) ацетоуксусная кислота (ацетоацетат)

б) β-оксимасляная кислота (β-оксибутират)

в) β-оксибутирил-КоА

г) β-окси-β-метил-глутарил-КоА

д) мевалоновая кислота (мевалонат)

Тест 2

Выберите правильнЫЙ ответ:

Функцией апо А1 является:

а) активация липопротеинлипазы

б) активация лецитинхолестеролацилтрансферазы (ЛХАТ)

в) транспорт эфиров холестерола



г) транспорт триацилглицеролов

д) активация ацилКоАхолестеролацилтрансферазы (АХАТ)

Тест 3

ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:

Транспорт экзогенного холестерина и триацилглицеролов из кишечника в ткани осуществляют:

а) хиломикроны

б) ЛПОНП и ЛПНП

в) ЛПВП

г) хиломикроны, ЛПОНП, ЛПНП

д) ЛПНП, ЛПОНП, ЛПВП

Тест 4

Выберите правильнЫЙ ответ:

Функцией апо С2 является:

а) активация липопротеинлипазы

б) активация лецитинхолестеролацилтрансферазы (ЛХАТ)

в) транспорт эфиров холестерола

г) транспорт триацилглицеролов

д) активация ацилКоАхолестеролацилтрансферазы (АХАТ)

Тест 5

ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:

Транспорт эндогенного холестерина и триацилглицеролов из печени в ткани осуществляют:

а) хиломикроны

б) ЛПОНП и ЛПНП

в) ЛПВП

г) хиломикроны, ЛПОНП, ЛПНП

д) ЛПНП, ЛПОНП, ЛПВП

Тест 6

ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:

Транспорт холестерина из внепеченочных тканей в печень осуществляют:

а) хиломикроны

б) ЛПОНП и ЛПНП

в) ЛПВП

г) хиломикроны, ЛПОНП, ЛПНП

д) ЛПНП, ЛПОНП, ЛПВП.

Тест 7

ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:

Образование ЛПНП происходит:

а) в печени

б) в печени и кишечнике

в) в кишечнике

г) в крови из ЛПОНП

д) в крови из хиломикронов и ЛПОНП

Тест 8

ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:

Наиболее эффективно для оценки степени риска развития атеросклероза является определение содержания в крови:

а) общего уровня холестерина

б) холестерина в ЛПНП

в) холестерина в ЛПВП

г) холестерина в ЛПОНП и ЛПНП

д) соотношение холестерина ЛПОНЛ, ЛПНП к холестерину ЛПВП

Тест 9

ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:

Атерогенными липопротеинами являются:

а) ЛПВП

б) ЛПНП, ЛПОНП

в) ЛПНП, ЛПВП

г) ЛПОНП, ЛПВП

д) хиломикроны

Тест 10

ВыбЕрИтЕ правильнЫЙ ответ:

Основные этапы синтеза холестерина в клетке имеют общие реакции с:

а) синтезом жирных кислот

б) распадом жирных кислот

в) синтезом фосфолипидов

г) синтезом кетоновых тел

д) синтезом триацилглицеридов

Тест 11

ВыбЕрИтЕ все правильныЕ ответЫ:

Катаболизм холестерина связан с синтезом :

а) тиреоидных гормонов

б) желчных кислот

в) гормонов коры надпочечников

г) гормонов мозгового слоя надпочечников

д) эргокальциферола

Тест 12

Выберите все правильныЕ ответЫ:

Коррекция дислипидемии при атеросклерозе проводится лекарственными веществами, которые :

а) ингибируют активность гидроксиметилглутарил-КоА-редуктазы

б) активируют метаболизм ЛПНП

в) угнетают образование ЛПВП

г) угнетают образование ЛПНП

д) обладают антиоксидантным и мембранопротекторным действием

Тест 13

Выберите все правильныЕ ответЫ:

Причинами повышения уровня холестерина в крови являются:

а) нарушение оттока желчи из желчного пузыря

б) нарушение синтеза желчных кислот

в) ингибирование гидроксиметилглутарил-КоА-редуктазы

г) снижение активности лецитинхолестеролацилтрансферазы

д) уменьшение количества или нарушение структуры рецепторов ЛПНП

Тест 14

УСТАНОВИТЕ СТРОГОЕ СООТВЕТСТВИЕ.

Апобелки липопротеинов: Функция апобелка:

1) апо А1 а) кофактор внепеченочной липопротеинлипазы

2) апо С2 б) лиганды рецепторов хиломикрона

3) апо Д в) кофактор лецитинхолестеролацилтрансферазы

4) апо В48 г) транспорт эфиров холестерина

д) кофактор панкреатической липазы

Тест 15

ДОПОЛНИТЕ ОТВЕТ.

Лимитирующей реакцией синтеза холестерина являетсяобразование ___________, регуляторный фермент - ___________.

 

Тест 16.

УСТАНОВИТЕ СООТВЕТСТВИЕ

(для каждого вопроса – один или несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз).





sdamzavas.net - 2019 год. Все права принадлежат их авторам! В случае нарушение авторского права, обращайтесь по форме обратной связи...